肉的宰后嫩化必要归因于肌原合成钎维成分的破环，肌原合成钎维成分是由内源性球淀粉酶质电离酶光分解肌原合成钎维和血神经血神经组织骨架球淀粉酶质带来的。与数几年来向来是点赞目光的钙球淀粉酶质酶不同于，胱天球淀粉酶质酶（caspases）近期称为感的兴趣说说题。胱天球淀粉酶质酶在血神经血神经组织凋亡的执行命令的阶段起着至关必要的效应，在其中caspase-3在临死前球淀粉酶质电离中的效应是多各方面面和比较复杂的，对此有必要进几步探索。S-亚硝基化实现调钙释放出、动能代谢率、球淀粉酶质质光分解和血神经血神经组织凋亡来调吃起来，收录嫩度和持水效果。的早期探索会发现S-亚硝基化也可以变动信任线粒体的caspase-3级联现象，这很有可能是肌肉群血神经血神经组织凋亡和羊肉的品质发展的主观原因。caspase-3的探索内容是其与血神经血神经组织凋亡的联系，然后，非常少有探索浅议S-亚硝基化调caspase-3的原则。

2024年9月由无锡渔业本科大学张万刚专家团队合作在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱生物体为该研究提供了亚硝基化掩盖组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文字幕大标题：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

中文核心期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2023年关系成分：5.7

刊发周期：2024年9月

用户政府部门：南京农业大学

钻研材质：蛋白

拜谱提高工艺：亚硝基化修饰组学

技術行车路线：

一、深入分析报告单

01.Caspase-3特异性

如今尚不了解清楚NO对caspase-3的治理和改善做用有没得归因于NO介导的S-亚硝基化，有所差异氨水浓度均值的GSNO作外源性NO提供，以引导caspase-3的离体S-亚硝基化。数据取决于，与没得GSNO的组比起来，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活力同质性影响（图1），与之前简讯完全一致。GSNO正确处理影响caspase-3活力的自身情况仍急待系统阐述。

图1 各种不同密度的GSNO办理对caspase-3渗透性的影晌

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化情况

学习Caspase-3的亚硝基化成度，以阐释GSNO对Caspase-3的反應性。经GSNO清理后，论文的检测到caspase-3蛋白质S-亚硝基化抗压强度扩大（图2）。这导致表示，外源性GSNO养成可好引诱caspase-3的体内S-亚硝基化。这令震惊的是，在没GSNO会存在的差表组中论文的检测到一家不大的S-亚硝基化带，这表示caspase-3能够会出现内源性的S-亚硝基化。不仅，本学习中caspase-3的S-亚硝基化成度较高，而caspase-3的活性酶削减，这与前的学习同一。显然，caspase-3的特异形S-亚硝基化突显位点尚不看清楚，还要求进一歩的研究。

图2 GSNO进行处理对caspase-3S-亚硝基化层次的的影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化掩盖组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的字段。黑色标示的字段觉得S-亚硝基化肽，黑色标示的C觉得S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3降解塑料结蛋白质

结淀粉酶对于一些最核心的癌受损细胞骨架淀粉酶，在维护肌癌受损细胞组成部分的组成部分完正性和做收缩性上起着最核心效果，研发S-亚硝基化caspase-3对结淀粉酶光化学降解的比较敏理想化有最核心价值。与Std（未用胱天淀粉酶酶-3和GSNO孵育的缺省肌植物纤维素淀粉酶）组比较，0 μM GSNO组（肌原植物纤维素和caspase-3的孵育，无GSNO）的完正结淀粉酶能力不错降，温馨提示caspase-3对结淀粉酶有因素的淀粉酶油脂水解能力素质。在GSNO孵育后，完正结淀粉酶的能力明显的加剧（P < 0.05）。另外，当GSNO溶液浓度提升时，完正结淀粉酶的能力长期上浮（P < 0.05）（图5）。上述显示证实，SNO呈现的caspase-3以能力依耐的手段能够抑制结淀粉酶的光化学降解。

图5.S-亚硝基化caspase-3降解塑料结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3化学降解肌钙淀粉酶-T

肌钙淀粉酶-T (TnT)是原肌球淀粉酶调接担任肌肉群做收缩的丝条的所需肌原黏胶黏胶纤维板淀粉酶。TnT的可挥发功能是测量到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化生活条件下，caspase-3对TnT的可挥会发现象长为6一样，与Std组（因为无含caspase-3和GSNO的肌原黏胶黏胶纤维板）相较，caspase-3组中30 kDa TnT精彩情节偏态加入，证明caspase-3直接参与了TnT的可挥发，于此，caspase-3与GSNO的孵育引发30 kDa TnT减轻。在100和200 μM GSNO组间无测量到特别的距离(P > 0.05)，而当GSNO的含量满足400 μM 时，该精彩情节偏态缩短(P < 0.05)。以下会发现证明了SNO装饰的caspase-3对TnT可挥发的抑定制用的功效。结淀粉酶和TnT是caspase-3的敏感性底物，而GSNO处置减轻caspase-3的活力性也许 引发肌原黏胶黏胶纤维板淀粉酶可挥发系数减轻。上面阐明，NO引诱的S-亚硝基化能够能够 装饰半胱氨酸残基来调接caspase-3的活力性，必将进一次不良会影响其对结淀粉酶和TnT的淀粉酶蛋白质水解特性，然而不良会影响鸡肉品性。

图6. S-亚硝基化caspase- 3分解肌钙球蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结

本浅议重要途径浅议S-亚硝基化对caspase-3装饰的危害极其随后不久对鸡肉片肌原钎维身体外吸附的危害。球血清S-亚硝基化能够装饰caspase-3的半胱氨酸残基，然而产生caspase-3几丁质酶大幅度降低，进一次抑止了其对鸡肉片肌原钎维球血清的球血清淀粉水解学习能力。

三、拜谱个人心得体会

实验主要包括了酶活校正，亚硝基化表达组学科研，WB等判断的方法，看到血清S-亚硝基化能表达caspase-3的半胱氨酸残基，这会导致了caspase-3化学活化的降低，齐头并进每一步控制了其对羊肉肌原氯纶血清的血清核脂肪酸水解功能。本实验为解释一下血清质亚硝基化对肉质地的政策调控管理机制供应好几个个新的的视野。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的球胆固醇组学、体现球胆固醇组学、产生组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸系列设备设备，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺酸性反应、total氧化物重现、游离于巯基，欢迎大家咨询！

对比论文文献：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663